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上海仁捷生物發(fā)布-豬（NGAL2）elisa檢測原理

更新時間：2017-06-29

瀏覽次數(shù)：1953

豬中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白2（NGAL2）試劑盒（ELISA）試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被豬中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白2（NGAL2）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白2（NGAL2）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒組成：

名稱	96孔配置	48孔配置	備注
微孔酶標板	8孔×12條	8孔×6條	無
標準品	0.3mL*6管	0.3mL*6管	無
樣本稀釋液	6mL	3mL	無
檢測抗體-HRP	10mL	5mL	無
20×洗滌緩沖液	25mL	15mL	按說明書進行稀釋
底物A	6mL	3mL	無
底物B	6mL	3mL	無
終止液	6mL	3mL	無
封板膜	2張	2張	無
說明書	1份	1份	無
自封袋	1個	1個	無

備注：

1. 標準品濃度依次為：240、120、60、30、15、7.5 pg/mL

2. 經(jīng)過大量正常標本檢驗，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi)，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時，可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。（例如下圖）

試劑盒性能

檢測范圍：7.5 pg/mL – 240 pg/mL。
靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

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